Objetivo

Desenho

Resultados

Resumo

 

 

A comunidade microbiana de um ambiente específico, neste caso da pele, é chamada microbiota. Para analisar a comunidade microbiana, os micro-organismos podem ser identificados pelo sequenciamento dos genes ribossômicos e todos os genes de uma comunidade microbiana são chamados de microbioma.

A microbiota da pele consiste em bilhões de micro-organismos; muitos deles são especializados em certas condições ambientais e também em diferentes regiões do corpo.1 A composição é dependente de: temperatura, umidade, nutrientes, pH e outros parâmetros físicos e químicos. Também se deve salientar que cada ser humano tem seu microbioma individual, que é temporariamente estável, mas que, diferentemente da impressão digital ou do DNA, pode mudar com o passar do tempo.1-3

Como existe uma interação benéfica entre as várias espécies na comunidade microbiana e o sistema imune hospedeiro, uma boa diversidade é desejável.1 Além disso, diversas comunidades se adaptam melhor a mudanças no ambiente em geral. Em uma pele que não está saudável pode ser encontrada uma baixa diversidade microbiana, além de doenças como dermatite atópica.1 Certas espécies que dominam o microbioma da pele podem ser correlacionadas com sintomas clínicos típicos.

Cientistas cosméticos tentam achar maneiras de manter ou até melhorar a diversidade do microbioma de uma pele saudável. Para poder analisar a influência de substâncias ou de fatores externos no microbioma da pele, a individualidade desse microbioma deve ser considerada. Portanto, dois indicadores de diversidade são importantes nessa questão. Primeiramente a diversidade alfa, que é uma medida do número efetivo de espécies e, portanto, da riqueza microbiana em um ambiente particular, da localização, da amostra ou do grupo amostral. O Índice Shannon mede quão uniformemente os diferentes micro-organismos estão distribuídos na amostra. Geralmente, pode-se dizer que quanto mais alto é o índice, mais alta é a diversidade do microbioma e, portanto, melhor é a condição da pele.

A diversidade beta é uma medição da diferença entre comunidades microbianas de ambientes, localizações ou amostras diferentes. Isso possibilita a comparação entre grupos ou áreas que foram tratadas diferentemente. Ambos os indicadores são importantes ao avaliar o impacto de substâncias ou medidas no microbioma.

 

Objetivo

Conservantes são desenhados para inibir o crescimento de micro-organismos, para, dessa forma, proteger produtos cosméticos da deterioração e os usuários de infecções indesejáveis por patógenos. Seria possível assumir que esses ingredientes podem também ter influência nos micro-organismos não apenas no produto cosmético, mas também nos micro-organismos da pele após a aplicação. Essas considerações nos levaram a planejar um teste dermatológico com vários painelistas voluntários.

O contexto de nossa investigação foi descobrir se o conservante euxyl® PE 9010 (mistura de Phenoxyethanol e Ethylhexyglycerin) em concentrações usuais tem influência detectável na composição do microbioma de uma pele saudável. O conservante euxyl® PE 9010 tem amplo espectro de eficácia contra bactérias, fungos e leveduras, protegendo fórmulas não enxaguáveis, assim como formulações para lenços umedecidos, em concentrações recomendadas entre 0,50% e 1,00%. O produto é líquido, adequado para uso em ampla faixa de pH e estável termicamente, o que facilita o processo e sua aplicação.

 

Desenho

O objetivo deste estudo exploratório foi investigar o efeito de um produto cosmético com o conservante no microbioma da pele, em comparação a uma área-controle não tratada, por um período de tempo longo e sob condições reais de uso. Para este estudo, 23 painelistas, homens e mulheres, com pele saudável na face volar do antebraço, foram inscritos. O produto testado (G 8453) foi aplicado 2 vezes ao dia pelos painelistas (Figura 1). O efeito do produto testado (G 8453) no microbioma da pele foi avaliado por swab antes da primeira aplicação, no começo do estudo (linha-base), e após 3 semanas (dia 22).

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Com essa configuração, 4 grupos de amostras foram analisados. As amostras foram divididas em dois pontos de momento (linha-base e dia 22) e diferenciadas em amostras tratadas e não tratadas com o creme contendo 1% euxyl® PE 9010.

A identificação dos micro-organismos foi feita por meio de amplificação 16s rRNA e subsequente sequenciamento.

 

Resultados

O teste de desafio realizado, CosPet, indicou que a concentração definida do conservante 1,0% euxyl® PE 9010 foi suficiente para proteger o produto de contaminações microbianas. Para esse propósito, amostras preservadas e não preservadas foram inoculadas com micro-organismos, conforme a Figura 2.

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Durante a incubação subsequente, amostras foram es[1]triadas em placas de ágar, em vários tempos, e avaliadas de acordo com a Tabela 1.

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Os resultados do CosPet demonstram um nível adequado de preservação da formulação G 8453. Os requisitos do critério A foram atingidos contra bactérias, assim como para fungos e leveduras (Tabela 2).

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Na Figura 3, é apresentada a diversidade relativa individual dos 10 gêneros mais abundantes em todos os painelistas, os tempos e os tratamentos. Diferenças individuais são óbvias, mas diferenças entre a linha-base e o final do teste após 3 semanas ocorrem com menos frequência. O mesmo se aplica a áreas tratadas e não tratadas.

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O gráfico (Figura 4) se resume aos primeiros 10 grupos de micro-organismos encontrados na pele dos 23 painelistas. Cada grupo consiste em diferentes espécies que estão proximamente relacionadas. Em geral, o filo Firmicutes, incluindo espécies de Staphylococcus, Actinobacteria (como Corynebacteria) e Proteobacteria, é predominantemente encontrado.

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Para a avaliar a diversidade alfa (α) como um valor de regularidade e riqueza microbiana foi calculado o Índice de Shannon.

Um alto Índice de Shannon demonstra uma riqueza alta e regular. O índice de Shannon obtido foi entre 2,5 e 3, que estava na faixa normal para a face volar do antebraço, para ambas as condições de teste, em todos os tempos de avaliação.4 Isso indica que os conservantes usados não tiveram efeito sobre a riqueza microbiana do microbioma da pele.

Para a avaliação da diversidade beta (β), (dissimilaridade) dos microbiomas, foram avaliadas distâncias genéticas para determinar mudanças na comunidade microbiana. Nenhuma diferença significativa foi observada considerando a comparação dos tempos, assim como para a comparação dos tratamentos, indicando que a composição geral da comunidade não foi alterada pelo tratamento. Os resultados indicam que o uso regular de um cosmético não enxaguável com o euxyl® PE 9010, composto de Phenoxyethanol e Ethylhexylgly[1]cerin, não tem efeito significativo na composição geral do microbioma da pele e, portanto, é amigável ao microbioma.

 

Resumo

Como resultado deste estudo, as mudanças observadas no produto testado G 8453 em diversidade alfa (α) não tiveram efeito significativo na composição geral da comunidade microbiana. Nenhuma redução da biodiversidade foi observada após a aplicação do produto testado que continha o conservante euxyl® PE 9010.

Com base nos dados de microbioma obtidos neste estudo, e após um tratamento regular da pele por três semanas, nenhum sinal de dano no microbioma da face volar do antebraço foi observado. Esses resultados confirmam o perfil amigável do produto testado.

 

 

Dr. Lea Holsten é a Team Leader em microbiologia e Dr. Klaus Weber é o Senior R&D Expert da Ashland Specialties Deutschland GmbH, Norder[1]stedt, Schleswig-Holstein, Alemanha

 

Este artigo foi publicado na revista Cosmetics & Toiletries (Brasil) 34(5): 8D-11D, 2022
Conteúdo patrocinado por Ashland